细胞仪有什么作用?

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1、细胞器的计数与定位 通过观察细胞器在细胞中的位置,可以大致区分细胞器之间的差异;而通过观测细胞中特定的细胞器,可以帮助我们研究特定细胞器的功能和结构。 为了进行上述研究,需要将待测细胞用细胞器标记物染色,然后将细胞置于显微镜下观察。但仅凭肉眼来统计“有几个细胞器”是十分困难的,这时候就可以利用细胞仪来快速地计数大量的细胞。 在对细胞器进行定量研究时,一般采用酶标法或荧光素标记法,先让细胞摄取包被了相应标记物的培养液,然后收集细胞并制作成涂片。如果在荧光显微镜下能够观察到相应的标记物,说明细胞已经成功完成了标记过程。 最后,把制备好的细胞标本放入细胞仪中进行扫描,根据每批样品的平均光密度值来计算出每个细胞中含有多少个细胞器即可。

2、蛋白的定性定量和定位 利用细胞器标记物对细胞进行染色后,可以通过免疫细胞化学的方法来检测细胞内各种蛋白的表达量。首先利用细胞器膜表面蛋白的特异抗体对细胞进行免疫反应,如果免疫组化检测到了抗原物质的存在,就说明细胞内的确含有该种类型的细胞器以及这些细胞器中所含的蛋白。 如果需要对蛋白含量进行定量分析,则可以将待测蛋白的特异性 antibody 用 ELISA 方法来测定其含量。 除了检测蛋白的表达量之外,利用细胞免疫色谱法还可以对蛋白表达的位置进行定位研究。

3、核酸分子数量与分布 了解基因表达的模式和过程,是探索基因功能的关键,而了解基因表达的水平更是阐明基因功能的重要基础。如何准确评估目的DNA 或mRNA 的含量,是一个重要的研究课题。 利用流式细胞术可以进行定性、定量分析,能够准确测量细胞中 DNA、RNA 和蛋白质的量,同时还能对它们的分布进行定位。还能够结合微阵列技术对基因组进行高通量测序,以获得序列信息。

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